Human herpesvirus 8 (HHV-8) detected by nested polymerase chain reaction (PCR) in HIV patients with or without Kaposi's sarcoma. An analytic cross-sectional study / Herpesvírus humano 8 (HHV-8) detectado por reação da polimerase em cadeia do tipo nested PCR em pacientes HIV-positivos com ou sem sarcoma de Kaposi. Um estudo transversal analítico

CONTEXT AND OBJECTIVE: Kaposi's sarcoma (KS) is a common neoplastic disease in AIDS patients. The aim of this study was to evaluate the frequency of human herpesvirus 8 (HHV-8) infection in human immunodeficiency virus (HIV)-infected patients, with or without KS manifestations and correlate HHV-8 detection with KS staging. DESIGN AND SETTING: Analytic cross-sectional study conducted in a public tertiary-level university hospital in Ribeirão Preto, São Paulo, Brazil. METHODS: Antibodies against HHV-8 lytic-phase antigens were detected by means of the immunofluorescence assay. HHV-8 DNA was detected in the patient samples through a nested polymerase chain reaction (nested PCR) that amplified a region of open reading frame (ORF)-26 of HHV-8. RESULTS: Anti-HHV-8 antibodies were detected in 30% of non-KS patients and 100% of patients with KS. Furthermore, the HHV-8 DNA detection rates observed in HIV-positive patients with KS were 42.8% in serum, 95.4% in blood samples and 100% in skin biopsies; and in patients without KS, the detection rate was 4% in serum. Out of the 16 serum samples from patients with KS-AIDS who were classified as stage II, two were positive (12.5%); and out of the 33 samples from patients in stage IV, 19 (57.6%) were positive. CONCLUSION: We observed an association between HHV-8 detection and disease staging, which was higher in the serum of patients in stage IV. This suggests that detection of HHV-8 DNA in serum could be very useful for clinical assessment of patients with KS and for monitoring disease progression.

CONTEXTO E OBJETIVO: Sarcoma de Kaposi (SK) é uma doença neoplásica comum em pacientes com aids. O objetivo deste estudo foi avaliar a frequência da infecção por herpesvírus humano 8 (HHV-8) em pacientes infectados por HIV, com ou sem SK e associar a detecção do HHV-8 com o estadiamento do SK. TIPO DE ESTUDO E LOCAL: Estudo transversal analítico realizado em hospital universitário público terciário de Ribeirão Preto, São Paulo, Brasil. MÉTODOS: Anticorpos contra antígenos de fase lítica do HHV-8 foram detectados por imunofluorescência. O DNA viral de HHV-8 foi detectado em amostras de pacientes pela reação em cadeia da polimerase do tipo nested (nested PCR), que amplificou uma região do fragmento de leitura aberta (ORF)-26 do HHV-8. RESULTADOS: Anticorpos anti-HHV-8 foram detectados em 30% dos pacientes sem SK e 100% dos com SK. Além disso, a detecção de HHV-8 DNA observada em pacientes HIV-positivos com SK foi de 42,8% no soro, 95,4% em amostras de sangue e 100% em biópsias de pele, e em pacientes sem SK foi de 4% no soro. Das 16 amostras de soro de pacientes com SK-AIDS classificados como estádio II, duas foram positivas (12,5%) e, das 33 amostras de pacientes no estádio IV, 19 (57,6%) foram positivas. CONCLUSÃO: Observamos associação entre a detecção do HHV-8 e o estadiamento da doença, que foi maior no soro de pacientes no estágio IV. Isso sugere que a detecção do HHV-8 no soro poderia ser muito útil para a avaliação clínica de pacientes com SK e para o monitoramento da progressão da doença.

Virus herpes humano 8: detección en células mononucleares de sangre periférica de pacientes con la infección por el virus de inmunodeficiencia humana: con/sin sarcoma de kaposi / Human herpes virus 8: detection in peripheral blood mononuclear cells from patients with human immunodeficiency virus infection with/without kaposi sarcoma

El ácido nucleico proveniente del virus herpes humano 8 esta presente en las células mononucleares de sangre periférica de un 50% a 90% de los pacientes con sarcoma de Kaposi, y 7% a 10% de los pacientes con la infección por el virus de inmunodeficiencia humana sin sarcoma de Kaposi. Nosotros estudiamos la prevalencia del virus herpes humano 8 en células mononucleares de sangre periférica provenientes de pacientes con la infección por el virus inmunodeficiencia humana con/sin sarcoma de Kaposi. Setenta y seis pacientes con la infección por el virus de inmunodeficiencia humana sin sarcoma de Kaposi y 15 pacientes con sarcoma de Kaposi asociado a la infección por el virus de inmunodeficiencia humana se incluyeron en el estudio. El ácido desoxirribonucleico se extrajo utilizando el método de fenol/cloroformo. El ácido desoxirribonucleico fue amplificado a través de la reacción en cadena de la polimerasa utilizando las sondas KS1 y KS2 específicas para el ORF26 del virus herpes humano 8. Las reacciones se consideraron positivas sólo si los productos de la región esperada de 233 pares de bases. Ninguno de los pacientes con la infección por el virus de inmunodeficiencia humana mostró la presencia de virus herpes humano 8 en las células mononucleares de sangre periférica, y después de un seguimiento de 2 años, ninguno ha desarrollado sarcoma de Kaposi. El virus herpes humano 8 se detectó en las células mononucleares de sangre periférica del 20% de los pacientes con sarcoma de Kaposi. Todos los pacientes pertenecían al grupo de "altó riesgo", y eran varones homosexuales. Ninguno recibió transfusiones sanguíneas. Estos datos preliminares sugieren que la prevalencia del virus herpes humano 8 en las células mononucleares de sangre periférica de los pacientes con la infección por el virus de inmunodeficiencia humana con/sin sarcoma de Kaposi es probablemente baja en comparación con pacientes provenientes de Estados Unidos y Europa

The nucleic acid of human herpes virus 8 is present in the peripheral blood mononuclear cells of between 50% and 90% of Kaposi sarcoma patients, 7% and 10% of human immunodeficiency virus infected patients without Kaposi sarcoma. We studied the prevalence of human herpes virus 8 in peripheral blood mononuclear cells from patients with human immunodeficiency virus infection with/without Koposi sarcoma. Seventy-six patients with human immunodeficiency virus infection without Kaposi sarcoma associated with human immunodeficiency virus infection were included. Desoxibonucleico acid was extracted from the sample by a standard phenol/chloroform extraction procedure. Desoxirribonucleico acid was polimerase chain reaction amplified using Kaposi sarcoma 1 and Kaposi sarcoma 2 primers specific for the human herpes virus 8 ORF26. Polimerase chain reaction were considered positive only if the polimerase chain reaction products hybridized in the expected 233 by region. None of human immunodeficiency virus infected patients showed the presence of human herpes virus 8 in the peripheral blood mononuclear cells, and after a follow-up of 2 years, none has developed Kaposi sarcoma. Human herpes virus 8 was detected in the peripheral blood mononuclear cells from 20% of patients with Kaposi sarcoma. All patients belonged to a "high risk group", were male and homosexuals. None received blood transfusion. These preliminary data suggest that the prevalence of human herpes virus 8 in peripheral blood mononuclear cells from human immunodeficiency virus infected patients with/withoul Kaposi sarcoma is probably low in comparison with patients from EE.UU and Europe

Seroprevalence of Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus in various populations in Cuba

OBJETIVO: Se sabe poco acerca de la prevalencia y distribución en el Caribe de la infección por el herpesvirus asociado con el sarcoma de Kaposi (HVSK). El objetivo del presente estudio fue determinar las tasas de seropositividad a HVSK en diversas poblaciones en Cuba. MÉTODOS: Durante el período de 1998 a 2002 se examinaron muestras de suero de 410 personas en Cuba. El tamizaje serológico de los anticuerpos contra HVSK se realizó en dos pasos con las siguientes técnicas: 1) ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IFI) con reactividad específica a la porción del antígeno de HVSK asociado a la latencia (ANAL) que está codificada por la plantilla de lectura abierta 73 (ORF73), y 2) inmunoblot (Western) confirmatorio, usando como antígeno blanco la proteína ORF65.2 de HVSK recombinante, que tiene 20 kilodaltones y se expresa durante la infección lítica. Cinco poblaciones diferentes fueron estudiadas: 1) 45 pacientes de sida con sarcoma de Kaposi (sida-KS); 2) 154 pacientes infectados por VIH-1 pero sin signos clínicos de sarcoma de Kaposi (SK); 3) 171 donantes de sangre con seronegatividad a VIH; 4) 27 receptores consecutivos de transplantes renales con seronegatividad a VIH y 5) 13 contactos (sexuales o por parentesco) de los pacientes de sida con SK. RESULTADOS: De las 45 personas con sida y SK, 35 (77,8%) mostraron seropositividad a HVSK. Treinta y dos (20,8%) de los 154 pacientes con seropositividad a VIH pero sin SK mostraron seropositividad a HVSK, y 6 de los 13 contactos (46,2%) de pacientes con SK estaban infectados por HVSK. A diferencia de otros investigadores, los autores del presente estudio no encontraron ninguna asociación entre la seropositividad a HVSK y la actividad homosexual o bisexual en personas de sexo masculino en las poblaciones cubanas estudiadas. En cambio, sí hallaron tasas elevadas de seropositividad a HVSK en mujeres que declararon haber tenido contacto sexual con hombres bisexuales y en hombres que habían adquirido la infección por VIH en el África. Las tasas de infección por HVSK fueron bajas en los donantes de sangre (1,2%) y en los receptores de transplantes renales (0,0%). Las tasas de infección por HVSK halladas en las poblaciones cubanas sin infección por VIH fueron tan bajas como las observadas en Europa y Estados Unidos de América. CONCLUSIONES: Nuestros resultados, sumados a otros resultados parecidos obtenidos en Brasil, Estados Unidos y Jamaica, indican que la infección por HVSK es poco frecuente en algunas...